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口蹄疫病原检测方法

   日期:2016-08-23     来源:聚农网    作者:jn720.com    浏览:91    
蹄疫反转录聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测疑似感染动物水疱皮或水疱液中所有血清型口蹄疫病毒,适用于口蹄疫病毒的检测、诊断和流行病学调查。
 
 
  原理:利用异硫氰酸胍方法提取RNA,在反转录酶的作用下,以RNA为模板,以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链。利用西安天隆科技有限公司生产的DTC型基因扩增仪,在TaqDNA聚合酶的作用下,经高温变性、低温退火、中温延伸的循环,使特异性DNA片段的基因拷贝数放大一倍。经过35个循环,最终使基因放大数百万倍。将扩增产物进行电泳,经溴化乙锭染色后,在紫外灯照射下,肉眼可见DNA片段的扩增带。该方法可以检测所有亚型的口蹄疫病毒,检测结果为阳性,需进一步采用分型诊断试剂盒进行进一步检测。
 
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